目前國(guó)內(nèi)的HCV抗體膠體金紙條均采用夾心法原理,因而檢測(cè)的靈敏度與特異性已不低于酶免產(chǎn)品,但值得注意的是,對(duì)于強(qiáng)陽性標(biāo)本的檢測(cè)效果并不理想,國(guó)內(nèi)約一半以上的市售丙肝抗體膠體金紙條存在明顯的HOOK效應(yīng),一些產(chǎn)品甚至把強(qiáng)陽性標(biāo)本完全測(cè)成陰性,這需要引起重視。
引起HOOK效應(yīng)的原因在于:當(dāng)樣品中的HCV抗體濃度過高時(shí),過量的HCV抗體首先與膠體金標(biāo)記的HCV抗原結(jié)合并完全封閉了有限量的膠體金標(biāo)記HCV抗原的反應(yīng)位點(diǎn),同時(shí)過量的HCV抗體先于膠體金標(biāo)記的HCV抗原到達(dá)檢測(cè)線位置,并與檢測(cè)線上的HCV抗原完全反應(yīng),使得后續(xù)到達(dá)的膠體金標(biāo)記的HCV抗原-HCV抗體復(fù)合物不能與檢測(cè)線上的抗原反應(yīng)形成金顆粒凝聚,故呈現(xiàn)HOOK效應(yīng);
解決的方案有:
- 尋找合適的原料配合方案
- 提高膜包被抗原和金標(biāo)記抗原的用量
- 優(yōu)化體系的反應(yīng)條件